肠杆菌科还傻傻分不清吗速戳,这儿有份秘籍

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肠杆菌科简介

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1.命名与分类原则

a.肠杆菌科细菌的种类繁多；

b.主要根据细菌的形态、生化反应、抗原性质以及核酸相关性进行分类；

c.根据《伯杰系统细菌学手册》（年）将肠杆菌科的细菌分为20个属：埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属、普罗威登斯菌属、变形杆菌属、摩根菌属、耶尔森菌属等。

2.主要分类

3.生物学特征

a.形态与染色：G-，杆菌，大小为（1.0～6.0）μm×（0.3～1.0）μm，散在排列。多数有周鞭毛（除志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC），无芽胞，少数菌属细菌可形成荚膜。

b.培养特性

??需氧或兼性厌氧；营养要求不高；最适生长温度35℃。

??普通培养基和麦康凯培养基：中等大小、表面光滑的菌落；

??在肠道选择培养基上，是否分解乳糖是初步分群的重要依据。

??液体培养基：混浊生长。

c.肠杆菌科细菌的生物学特性（生化反应）：

乳糖发酵试验：非致病菌（+），致病菌（-）（除外变形杆菌）；触酶（+），氧化酶（-），硝酸盐还原试验（+），葡萄糖O-F试验（+）

d.抗原结构

e.变异

菌落S～R变异

鞭毛H～O变异

耐药性变异

生化反应性质的改变

f.抵抗力

不强（无芽孢）。加热60℃，30分钟即被杀死。不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。对低温有耐受力，能耐胆盐、伊红、美兰、煌绿（肠道选择性培养基）。

4.微生物学实验

a.标本采集：

尽量在抗菌药物使用之前，根据临床症状，采集不同的标本。临床上常见的标本类型主要是血液、尿液、脓液和粪便等，血液等细菌数量少的标本需要先增菌再进行培养，尿液尽量采集晨尿的中段尿进行定量培养，脓液等分泌物可用无菌拭子直接采取。

b.分离培养

c.肠杆菌科与其他菌属的鉴别

初步鉴定：

①确定肠杆菌科的细菌：应采用葡萄糖O-F试验、硝酸盐还原试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以鉴别；

②肠杆菌科细菌的分群：多采用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分为三个类群；

③选择生化反应进行属种鉴别，KIA和MIU将细菌初步定属，可报告细菌名。

最后鉴定：

根据生化反应的结果初步定属、种，再用诊断血清做凝集反应才能作出最后判断，报告血清型。

d.肠杆菌科与其他菌属的鉴别

鉴定思路

5.苯丙氨酸脱氨酶试验

阳性：绿色

阴性：黄色

6.葡萄糖酸盐试验

阳性：黄绿色

阴性：蓝色

埃

希

菌

属

6个种：大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌、伤口埃希菌和艾伯特埃希菌。临床最常见的是大肠埃希菌。

1.形态与染色

G-，直短杆菌，（1.1～1.5）μm×（2.0～6.0）μm。多数有周鞭毛，能运动，有菌毛，有荚膜或微荚膜（尤其是引起肠道外感染的菌株）。

2.培养特性

??兼性厌氧；营养要求不高；最适生长温度35C°。

??普通营养肉汤：浑浊生长。

??普通营养琼脂：圆形，凸起，边缘整齐，灰白色的S型菌落，直径2～3mm。　

??血琼脂平板：少数菌株产生β-溶血环。

??MAC和SS琼脂：粉红色菌落（发酵乳糖）。

血琼脂平板：少数菌株产生β-溶血环

S-S——桃红色

中国蓝——蓝色

麦康凯——粉红色

EMB——紫黑色有金属光泽

3.生化反应

发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气，尿素酶试验（-）。

吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC）为++--。

克氏双糖铁琼脂（KIA）：斜面和底层均产酸产气，H2S（-），即AA+-。

动力-吲哚-尿素（MIU）培养基为++-。

IMViC：++--

KIA：AA+-

MIU：++-

4.抗原结构

菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。

??O抗原：多糖磷脂复合物（LPS），现已知有种O抗原。

??H抗原：不耐热的蛋白质，已知56种H抗原。

??K抗原：多糖荚膜抗原，对热稳定，在K抗原存在时可阻止O凝集。

一个菌株的抗原类型由特殊的O、K和H抗原的代码表示，其血清型别的方式是按O：K：H排列，例如O：K58：H2。

5.致病性

致病物质：侵袭力、内毒素、肠毒素。

①侵袭力K抗原：抗吞噬,可引发炎症。

②内毒素：毒性部位为细胞壁的类脂A,可引发发热、休克、DIC等,引起肠液分泌增加，导致腹泻。

③肠毒素：不耐热肠毒素(LT)、耐热肠毒素(ST)

6.所致疾病：

?肠外感染：以泌尿系统感染（UTI）常见，还有菌血症，胆囊炎，腹腔脓肿。

?肠道感染（致病性大肠埃希菌）：引起人腹泻的大肠埃希菌分5类。

备注：EHEC：又称产志贺样毒素（VT）大肠埃希菌（SLTEC或UTEC），其中O：H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS），致死率高。本菌与志贺菌相似，动力阴性，乳糖不发酵或迟缓发酵与志贺菌的抗血清有交叉反应

主要的鉴别试验：

EHEC：山梨醇麦康凯琼脂（SMAC）直接筛选不发酵山梨醇的菌落，胶乳凝集试验检测O抗原

O:H7菌落特征（MAC）

O:H7菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）

7.微生物检验

a.标本采集

肠道感染可采集粪便；

肠道外感染可根据临床感染情况采集中段尿液、血液、脓汁、胆汁、脑脊液、痰、分泌液等。

b.检验方法及鉴定：

属内鉴定：常用的鉴定方法是使用商品化的细菌鉴定系统进行鉴定，方法简单便捷，准确率高。

志

贺

菌

属

人类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾（A群）、福氏（B群）、鲍氏（C群）和宋内（D群）志贺菌四群。

我国以福氏（B群）和宋内（D群）志贺菌引起的菌痢最为常见。

1.生物学特性

①形态与染色

G-，短小杆菌，（2～3）μm×（0.5～0.7）μm，无荚膜，无芽胞，无鞭毛，有菌毛。

②培养特性

需氧或兼性厌氧；

液体培养基：呈混浊生长；

普通琼脂平板和肠道选择培养基：形成中等大小、乳糖不发酵，半透明的光滑型菌落（宋内志贺菌可形成扁平、粗糙的菌落）。

③生化反应

??氧化酶试验（-），动力（-），赖氨酸（-），V-P（-），脲酶（-）

??IMViC：-+--

??KIA：KA--

志贺菌属的细菌分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖（宋内志贺可迟缓发酵乳糖）

志贺菌KIA（KA－－）MIU（－－－）

④抗原结构

只有O抗原，无鞭毛抗原，个别菌型及新分离菌株有K抗原，O抗原是分型的依据。

根据抗原构造可将志贺菌分为四个血清群（A、B、C、D），40余种血清型（包括亚型）。K抗原存在时能阻断O抗原与相应抗血清的凝集作用。加热℃、60分钟可消除K抗原对O抗原的阻断作用，在一定条件下可产生S-R变异及耐药性变异。

⑤抵抗力

较其他肠杆菌科细菌对理化因素抵抗力低，对酸敏感，耐碱不耐酸。

运送时需要使用PH7.0的磷酸盐甘油或转运培养基。

2.致病

（1）致病物质：

??内毒素：破坏肠粘膜；肠壁通透性；肠壁植物神经——腹痛，腹泻，里急后重，粘液脓血便。

??外毒素（志贺毒素，ST）：肠毒素活性；细胞毒活性；神经毒性。

（2）所致疾病：细菌性痢疾，简称菌痢。

①急性菌痢。

②中毒性菌痢（可致死亡）。

③慢性菌痢。

（3）传染源：病人和带菌者，经粪口传播。

急性细菌性痢疾

起病急，常有发热、腹痛、腹泻、脓血粘液便和里急后重等症。传染性强。

中毒型细菌性痢疾

儿童常见，多表现高热、惊厥、昏迷、休克、DIC、多器官功能衰竭等。

慢性细菌性痢疾病程持续两个月以上，反复发作，腹部不适，腹泻次数不定，以粘液便为主。

3.微生物学检验

a.标本采集

尽可能在发病早期及治疗前采集新鲜粪便，选择脓血便或黏液便，必要时可用肛拭子采集。

b.检验方法及鉴定：

C.增加生化反应：志贺菌属的诊断血清作群型鉴定到种型

4.防治原则

??人工主动免疫用于预防目前尚不理想；

??预防的主要措施是防止进食被污染的食品、饮料及水，及早发现及早积极治疗携带者；

??治疗细菌性痢疾一般首选氟喹诺酮类抗生素。

5.临床意义

致病因素为侵袭力、内毒素及外毒素（志贺菌A群／Ⅰ型和Ⅱ型产生志贺毒素，具有细胞毒、肠毒素、神经毒）。可引起人类细菌性痢疾，其中可分急性、慢性两种，小儿易引起急性中毒性痢疾。慢性菌痢可人-人传播，污染水和食物可引起暴发流行。

沙

门

菌

属

1.生物学性状

①形态与染色：G-，直杆菌，（0.7～1.5）μm×（2.0～5.0）μm，无芽胞，无荚膜，周鞭毛（除鸡沙门菌），能运动，多数有菌毛。

②培养特性

??兼性厌氧，营养要求不高，最适PH为6.8～7.8；

??液体培养基：均匀混浊生长；

??普通琼脂平板上菌落为圆形、光滑、湿润、半透明，边缘整齐的菌落；

??SS琼脂和麦康凯琼脂培养基：约2～4mm的透明或半透明菌落，乳糖不发酵，对胆盐耐受，产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心菌落。

③生化反应

不能发酵乳糖（除亚利桑那菌），不产生靛基质，不分解尿素，甲基红反应阳性，V-P试验阴性。大多数菌株产生H2S，发酵葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌产酸不产气）。

KIA（KA－＋）MIU（＋－－）

④抗原结构

O抗原：有58种，以阿拉伯数字依次标记，每个沙门菌的血清型可含一种或多种O抗原。

H抗原：H抗原是定型的依据。H抗原有两相，第一相为特异性抗原，用a、b、c……表示；第二相为共同抗原，用1、2、3……表示。

表面抗原：已证实沙门菌属有Vi、M和5抗原三种，最重要的是Vi抗原，抗吞噬。

⑤变异性

（1）S～R变异：光滑变粗糙型菌落

（2）H～O变异：有鞭毛到无鞭毛的变异

（3）相位变异：具有双相H抗原（第Ⅰ相为特异相，第Ⅱ相为非特异相）的沙门菌变成只有其中某一相H抗原的单相菌，称相位变异。

（4）V～W变异：失去全部Vi抗原的变异。

⑥抵抗力

（1）抵抗力不强，加热60℃1h或65℃15～20min即可被杀死

（2）对胆盐、煌绿有耐受力，可制备沙门菌的选择培养基。

2.致病

（1）致病因素：侵袭力、内毒素和肠毒素。

（2）所致疾病：

①肠热症，即伤寒与副伤寒病。由伤寒与副伤寒沙门菌所引起的慢性发热症状表现为发热，血培养阳性和肥达试验阳性。为法定传染病之一（两次）；

②食物中毒；

③慢性肠炎；

④败血症；

⑤沙门菌的局部感染如颈部、腰部等。

3.微生物学检验

①标本采集

根据不同疾病采取不同的标本进行分离与培养。

伤寒病原学原则上于发病第一周采血液，在患者寒战或高热高峰前后，并尽量在未使用抗生素之前，第二、三周采粪便，第三周可采集尿液培养。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。

食物中毒采集食物与粪便。

血清学诊断应在不同时期采集标本2-3份。

②检查方法及鉴定：

最后鉴定：

沙门菌血清学鉴定主要借助于沙门菌O抗原多价血清与O、H、Vi抗原的单价因子血清进行凝集试验，先用A-F多价O抗血清对沙门菌分离株进行分群，再用H因子血清检查第一相和第二相H抗原，综合O、Vi、H抗原进行判断沙门菌的血清型。

O多价血清（含A～F群）——定属

O、H、Vi抗原因子血清——定种

方法：

（1）从临床标本中分离到菌株经纯培养后，符合沙门菌属生物学特性；

（2）采用A-F多价血清初步确定是否为Salmonella

①如阳性，即用O因子血清分群；再用第一相H因子血清定型，也可用第二相辅助定型；

②如阴性：应考虑是否有Vi抗原?

4.防治原则

①预防沙门菌属细菌主要措施：加强饮食卫生，防止污染食品及水源经口感染，携带者的积极治疗，皮下注射死菌苗或口服减毒活菌苗。

②临床治疗：可选择的抗生素有氯霉素、氟喹诺酮类、氨苄西林、复方磺胺甲恶唑、三代头孢等。

变

财

杆

菌

属

变形、普罗威登斯及摩根这三个属的细菌为肠道寄居的正常菌群，在一定条件下能引起各种感染，也是医源性感染的重要条件致病菌。变形杆菌属包括4个种

普通变形杆菌（P.vulgaris）

奇异变形杆菌（P.mirabills）

产黏变形杆菌（P.myxofaciens）

潘氏变形杆菌（P.penneri）。

1.生物学特性

①形态与染色：G-，杆菌，两端钝圆，有明显的多形性，呈球状或丝状；周身鞭毛，运动活泼，无芽胞，无荚膜

②培养特性

??需氧或兼性厌氧，营养要求不高，生长温度10～43℃；

??营养琼脂和血琼脂平板：普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙扩散生长现象，可被胆盐或苯酚抑制。产黏变形杆菌具有产生黏液状薄膜层的能力及溶血性质；

??肠道选择培养基上形成圆形、扁平、无色半透明、乳糖不发酵的菌落，产H2S的菌种在SS上菌落中心呈黑色；

??液体培养基：迅速生长，早期培养物呈混浊，有部分沉淀。

③生化反应特性

??KIA：KA++（斜面产碱，底层产酸，培养基变黑）

??MIU：++/-+

??苯丙氨酸脱氨酶试验阳性，氧化酶阳性，脲酶阳性，能够迅速分解尿素（+++）

KIA（KA++）

MIU（++/-+）

苯丙氨酸脱氨酶试验（＋）

变形杆菌属的种鉴别：

（注：产黏变形杆菌木糖发酵阴性，潘氏变形杆菌对氯霉素天然耐药）

2.致病性

a.变形杆菌属

普通变形杆菌和奇异变形杆菌引起尿道、创伤、烧伤的感染。普通变形杆菌还可引起多种感染及食物中毒；奇异变形杆菌还可引起婴幼儿肠炎。产黏变形杆菌尚无引起人类感染的报道。

外-斐（Weil-Felix）反应：普通变形杆菌OX19、OX2、OXk的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，是用以诊断某些立克次体病的依据。

b.威登斯菌属本属菌可引起烧伤、创伤与尿道感染。

c.菌属本属细菌为医源性感染的重要病原菌之一。

3.微生物检验

①标本采集采集尿液、脓汁、伤口分泌物及婴儿粪便等。

②检验方法及鉴定

a.直接涂片

b.分离培养：接种于血琼脂平板和麦康凯或伊红亚甲蓝（EMB）琼脂平板；或SS琼脂和麦康凯或EMB琼脂平板上。

变形杆菌属在血琼脂上呈迁徙生长，在肠道菌选择培养基上形成不发酵乳糖菌落，在SS琼脂上常为有黑色中心的菌落。

c.鉴定

耶

尔

森

菌

属

耶尔森菌属包括11个种；其中鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌与人类致病有关。

1.鼠疫耶尔森菌

??俗称鼠疫杆菌，是烈性传染病鼠疫的病原菌。

??鼠疫是自然疫源性传染病，通过直接接触染疫动物或节肢动物叮咬而感染。与霍乱同属我国甲类传染病

2.小肠结肠炎耶尔森菌

a.生物学性状

①形态与染色：菌体大小为（1.0～2.0）μm×（0.5～1.0）μm，25℃培养时形成周鞭毛，有动力，呈翻滚旋转状运动，37℃培养无动力，无芽胞，无荚膜的革兰阴性球杆菌，偶有两极浓染。

②培养特性

??耐低温，在4℃～40℃均能生长，最适生长温度为20～28℃,营养要求不高；

??血平板：灰白色菌落；

??麦康凯平板：无色、半透明、扁平较小的菌落。

小肠结肠炎耶尔森菌（CIN琼脂平板）

小肠结肠炎耶尔森菌菌落特征（MAC）

③生化反应

嗜冷性，4℃冷增菌；

KIA：KA--（发酵葡萄糖和蔗糖产酸不产气，绝大多数菌株不发酵乳糖，H2S阴性）；

动力：25℃+，37℃－；

V-P试验：25℃+；37℃－；

脲酶：+；

鸟氨酸脱羧：+。

④致病性

a.致病因素：侵袭力和肠毒素。

b.所致疾病：小肠、结肠炎、菌血症

⑤微生物学检验

a.标本采集：标本来自被检者粪便、血液、尿液、食物或脏器组织等。

b.检验方法及鉴定：

克

雷

伯

菌

属

本属细菌共有7个种，医院感染日见增多，其中以肺炎克雷伯菌最为多见，产酸（催娩）克雷伯菌次之。

1.生物学特性

①形态与染色：G-，卵圆形或球杆状，成双排列，菌体外有明显荚膜，无鞭毛，无芽胞。

②培养特性：

??需氧或兼性厌氧，营养要求不高

??普通平板呈M型菌落

③生化反应：

??触酶（+）、脲酶（+）、氧化酶（-）、鸟氨酸脱羧酶（-）、动力（-）

??KIA：AA+-

??MIU：--+

??荚膜肿胀试验阳性:取培养物，滴加一滴于载玻片上，再加墨汁（或美蓝）染液一滴，再取抗血清一接种环，混匀，加盖玻片，油镜观察，阳性者在菌体周围出现较大的空白圈。

2.致病性　

??肺炎克雷伯菌肺炎亚种引起婴儿肠炎、肺炎、脑膜炎、腹膜炎、外伤感染、败血症和成人医源性尿道感染；

??臭鼻克雷伯菌引起臭鼻症；

??鼻硬节克雷伯菌引起鼻腔、咽喉和其他呼吸道的硬节病；

??催娩克雷伯菌可引起呼吸道和泌尿道感染、创伤感染与败血症等。

3.微生物学检验

4.抗菌药物敏感试验选择

该菌对氨苄西林天然耐药，由于携带质粒易形成耐药性，尤其易形成多重耐药性。

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教师补充

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1.细菌多重耐药是目前