肠杆菌科及检验

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　　肠杆菌科均为革兰阴性杆菌。分为20个属。大多数肠道杆菌属于正常菌群。其致病菌主要是埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属。年临床医学检验技师考试大纲 　　科目：1-基本知识2-相关专业知识3-专业知识4-专业实践能力

一、概述 　　（一）生物学特1.形态与染色革兰阴性杆菌，多数有周鞭毛，能运动，少数菌属如志贺菌属和克雷伯菌属无鞭毛。均不形成芽胞，少数菌属细菌可形成荚膜。2.培养和生化反应发酵葡萄糖产酸、或产酸产气，触酶阳性，除少数菌外，氧化酶阴性。3.抗原构造包括菌体（O）抗原，鞭毛（H）抗原和表面抗原（如Vi抗原、K抗原）3种。O抗原和H抗原是肠杆菌科血清学分群和分型的依据。表面抗原为包绕在O抗原外的不耐热的多糖抗原，可阻断O抗原与相应抗体之间的反应，加热处理能破坏其阻断作用。

　　（三）致病性1.伤寒和副伤寒2.食物中毒 　　如丙型副伤寒沙门菌、鼠伤寒沙门菌。3.细菌性痢疾 　　由志贺菌引起。4.其他感染 　　由大肠埃希菌等条件致病菌可引起泌尿生殖道、伤口等部位的感染。

　　（四）微生物检验1.分离培养 　　将粪便或肛拭标本立即接种在肠道菌选择培养基上；血、尿或脓汁等其他标本原则上不使用选择培养基。根据菌落特点、革兰染色及氧化酶反应结果作进一步鉴定。2.鉴定 　　（1）初步鉴定：①确定肠杆菌科的细菌，应采用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以鉴别；②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分为苯丙氨酸脱氨酶阳性、葡萄糖酸盐利用试验阳性和两者均为阴性反应三个类群；③选择生化反应进行属种鉴别。 　　一般将选择培养基上的可疑菌落分别接种克氏双糖铁琼脂（KIA）和尿素-靛基质-动力（MIU）复合培养基管中，并根据其六项反应结果，将细菌初步定属。 　　（2）最后鉴定：肠杆菌科各属细菌的最后鉴定是根据生化反应的结果初步定属、种，再用诊断血清做凝集反应才能作出最后判断。

二、埃希菌属 　　埃希菌属包括5个种，即大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。临床最常见的是大肠埃希菌。 　　大肠埃希菌俗称大肠杆菌，是人类和动物肠道正常菌群。 　　（一）生物学特性1.形态与染色 　　有周鞭毛，有菌毛、荚膜或微荚膜。2.培养特性 　　血琼脂平板上，少数菌株产生β-溶血环。在伊红亚甲蓝琼脂上，由于发酵乳糖，菌落呈蓝紫色并有金属光泽。麦康凯和SS琼脂中，耐受菌株可形成粉红色菌落。 　　当大肠杆菌分解乳糖产酸时细菌带正电荷被染成红色，再与美蓝结合形成紫黑色菌落，并带有绿色金属光泽。而产气杆菌则形成呈棕色的大菌落。

3.生化反应发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气，分解蔗糖因菌株而异，尿素酶试验阴性，吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC试验）为++--。克氏双糖铁琼脂（KIA）上斜面和底层均产酸产气，H2S阴性。4.抗原结构 　　大肠埃希菌的抗原由菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。现已知有种O抗原，种K抗原和56种H抗原。一个菌株的抗原类型由特殊的O、K和H抗原的代码表示，其血清型别的方式是按O：K：H排列，例如O：K58：H2。

　　（二）致疾病1.肠道外感染 　　以泌尿系统感染常见，高位严重尿道感染与特殊血清型大肠埃希菌有关。还有菌血症，胆囊炎，腹腔脓肿。2.肠道感染引起肠道感染的大肠埃希菌有下列五个病原群。（1）肠产毒性大肠埃希菌（ETEC）：产生肠毒素（2）肠致病性大肠埃希菌（EPEC）：引起婴儿腹泻（3）肠侵袭性大肠埃希菌（EIEC）：引起痢疾样腹泻（4）肠出血性大肠埃希菌（EHEC）：其中O：H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS）。（5）肠集聚性大肠埃希菌（EAEC）：引起婴儿腹泻。

　　（三）微生物检验1.标本采集2.检验方法及鉴定 　　（1）涂片与镜检： 　　（2）分离培养：粪便标本可用选择鉴别培养基进行分离，脓汁等可用血平板分离，取可疑菌落进行形态观察及生化反应。 　　（3）鉴定1）初步鉴定：根据菌落特征，涂片染色反应及细菌形态，取纯培养物作生化反应。凡符合KIA：A/A、产气、H2S-，MIU：动力+、吲哚+、脲酶-，甲基红+，硝酸盐还原+，VP-，氧化酶-，枸橼酸盐-，可鉴定为大肠埃希菌。2）最后鉴定：主要的鉴定试验为：氧化酶阴性、发酵葡萄糖产酸产气、发酵乳糖产酸产气、IMViC反应为++--（占94.6%）、脲酶阴性、H2S阴性、苯丙氨酸脱氨酶阴性、硝酸盐还原阳性、动力多数阳性。

4）血清学鉴定1.EPEC的血清学鉴定。2.EIEC的血清学鉴定。3.ETEC毒素的检测。4.EHEC的血清学鉴定。5.EAEC的鉴定。

三、志贺菌属 　　志贺菌属是人类细菌性痢疾最常见的病原菌，通称痢疾杆菌。根据生化反应与血清学试验该属细菌分为痢疾、福氏、鲍氏和宋内志贺菌四群。我国以福氏和宋内志贺菌引起的菌痢最为常见。 　　（一）生物学特性1.形态与染色 　　无鞭毛。2.培养特性 　　在SS培养基上形成中等大小、半透明的光滑型菌落，宋内志贺菌可形成粗糙的菌落。

3.生化反应分解葡萄糖产酸不产气，不分解乳糖（宋内志贺菌可迟缓分解乳糖），吲哚试验阴性，H2S阴性，MR试验阳性，VP试验阴性，不产生赖氨酸脱羧酶，不能利用柠檬酸盐，氧化酶试验阴性。

KIA培养基A：大肠埃希菌B：志贺菌C：对照管 　　志贺菌结果： 　　葡萄糖+ 　　乳糖- 　　动力-H2S-

4.抗原结构 　　根据抗原构造可将志贺菌分为四个血清群，40余种血清型（包括亚型）。K抗原存在时能阻断O抗原与相应抗血清的凝集作用。

　　（二）致病性1.急性菌痢。2.中毒性菌痢。3.慢性菌痢。

　　（三）微生物检验1.标本采集2.检验方法及鉴定（1）分离培养：取粪便接种强弱选择性不同的两个平板。强选择鉴别培养基可用沙门、志贺菌选择培养基（SS）；弱选择培养基可用麦康凯或中国蓝培养基。培养18～24h后选取可疑菌落进行下列鉴定。（2）鉴定1）初步鉴定：挑选可疑菌落先用志贺菌属多价诊断血清作试探性玻片凝集试验。将试探性凝集试验阳性的菌落至少接种2～3支KIA和MIU，经35℃培养18～24h，凡符合KIA：K/A、产气-、H2S-，MIU：动力-、吲哚-、尿酶-，并结合试探性玻片凝集试验阳性结果可鉴定为志贺菌属。2）最后鉴定：群诊断血清作群型鉴定。A群痢疾志贺菌，甘露醇阴性，10个血清型。B群福氏志贺菌，有6个血清型和X、Y各变型。C群鲍氏志贺菌，15个血清型。D群宋内志贺菌，仅有一个血清型，有光滑型和粗糙型两种菌落。

四、沙门菌属 　　（一）生物学特性1.形态与染色 　　除鸡沙门菌外都有周身鞭毛，多数有菌毛。2.培养特性 　　在SS琼脂和麦康凯琼脂培养基上形成透明或半透明菌落。产H2S者在SS琼脂上形成黑色中心菌落。

3.生化反应 　　一般不能发酵乳糖，不产生靛基质，不分解尿素，甲基红反应阳性，V-P试验阴性。大多数菌株产生H2S，发酵葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌产酸不产气）。4.抗原结构主要由O抗原和H抗原组成，部分菌株有与细菌的毒力有关表面抗原，称Vi抗原。 　　伤寒沙门菌KIA（K/A）MIU（+--）

　　（二）致病性1.肠热症 　　即伤寒与副伤寒病。2.食物中毒 　　引起食物中毒的沙门菌以鼠伤寒、肠炎、猪霍乱、乙型及丙型副伤寒沙门菌为常见。3.慢性肠炎 　　沙门菌可引起慢性肠炎。4.败血症 　　多由猪霍乱沙门菌引起。 　　（三）微生物检验1.标本采集 　　根据不同疾病采取不同的标本进行分离与培养。肠热症的第一、二周采血液，第二、三周采粪便与尿液。整个病程中骨髓分离细菌阳性率较高。食物中毒采集食物与粪便。

2.检查方法及鉴定 　　（1）分离培养1）粪便：直接接种于SS和麦康凯平板上。2）血液和骨髓：胆盐肉汤或葡萄糖肉汤增菌，48h将培养物移种到血平板和肠道鉴别培养基上，若有细菌生长取菌涂片革兰染色并报告结果。对增菌培养物连续培养7天，仍无细菌生长时，则报告阴性。3）尿液：无菌取中段尿液接种于肠道菌选择培养基或血平板上进行分离培养。

　　（2）鉴定：根据生化反应和血清学鉴定两方面进行。1）初步鉴定：如为革兰阴性杆菌时作氧化酶试验，阴性时，挑取可疑菌落分别移种于KIA和MIU上，并作生化反应。以沙门菌多价诊断血清作玻片凝集试验。凡符合KIA：K/A产气+/-、H2S+/-，MIU：动力+、吲哚-、氧化酶-、硝酸盐还原+，以沙门菌多价血清作玻片凝集试验阳性，鉴定为沙门菌属。2）最后鉴定：沙门菌血清学鉴定主要借助于O、H、Vi抗原的单价因子血清。 　　（3）血清学诊断：肥达试验：用已知的伤寒沙门菌O、H抗原，副伤寒甲、乙H抗原稀释后与被检血清作定量凝集试验，以检测患者血清中抗体的含量，来判断机体是否受沙门菌感染而导致肠热症并判别沙门菌的种类。

　　

　　志贺菌属包括哪些血清群（型） 　　A.痢疾志贺菌 　　B.福氏志贺菌 　　C.鲍氏志贺菌 　　D.宋内志贺菌 　　E.以上都是

『正确答案』E『答案解析』志贺菌属包括痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌、宋内志贺菌。

　　下列细菌中，引起细菌性痢疾症状最轻的是 　　A.痢疾志贺菌 　　B.福氏志贺菌 　　C.鲍氏志贺菌 　　D.宋内志贺菌 　　E.以上都不对

『正确答案』D『答案解析』宋内志贺菌引起细菌性痢疾症状最轻。

　　根据O抗原，志贺菌属分为多个群，其中A群为 　　A.痢疾志贺菌 　　B.福氏志贺菌 　　C.鲍氏志贺菌 　　D.宋内志贺菌 　　E.痢疾杆菌

『正确答案』A『答案解析』A群为痢疾志贺菌。

　　IMViC试验不包括 　　A.糖发酵试验 　　B.V-P试验 　　C.甲基红试验 　　D.枸橼酸盐利用试验 　　E.吲哚试验

『正确答案』A『答案解析』IMViC试验不包括糖发酵试验。

　　大肠埃希菌与沙门菌、志贺菌具有鉴别性的生化反应是 　　A.发酵乳糖 　　B.发酵山梨醇 　　C.发酵葡萄糖 　　D.硫化氢试验 　　E.明胶水解试验

『正确答案』A『答案解析』发酵乳糖试验，大肠埃希菌分解乳糖，沙门菌、志贺菌不分解乳糖。

　　肠杆菌科中，表面抗原是 　　A.O抗原 　　B.H抗原 　　C.K抗原 　　D.以上都是 　　E.以上都不是

『正确答案』C『答案解析』肠杆菌科中，表面抗原是K抗原。

　　可迟缓发酵乳糖的志贺菌 　　A.痢疾志贺菌 　　B.福氏志贺菌 　　C.鲍氏志贺菌 　　D.宋内志贺菌 　　E.B群志贺菌Y变种

『正确答案』D『答案解析』宋内志贺菌可迟缓发酵乳糖。

　　初步将志贺菌从肠道杆菌中鉴别出来的生化反应 　　A.培养基中加枸橼酸钾 　　B.菊糖发酵试验 　　C.尿素分解试验 　　D.胆汁溶菌试验 　　E.半固体双糖铁培养基接种试验

『正确答案』E『答案解析』半固体双糖铁培养基接种试验可初步将志贺菌从肠道杆菌中鉴别出来。

　　在KIA中，底黄斜红，无H2S，最可能的细菌是 　　A.大肠埃希菌 　　B.沙门菌 　　C.志贺菌 　　D.变形杆菌 　　E.产气杆菌

『正确答案』C『答案解析』变形杆菌在KIA中，底黄斜红，无H2S。

　　肥达反应有诊断价值的抗体效价，通常是 　　A.O凝集效价≥40，H凝集效价≥40 　　B.O凝集效价≥80，H凝集效价≥ 　　C.O凝集效价≥40，H凝集效价≥ 　　D.O凝集效价≥80，H凝集效价≥80 　　E.O凝集效价≥，H凝集效价≥80

『正确答案』B『答案解析』肥达反应抗体效价O凝集效价≥80，H凝集效价≥有诊断价值。

　　中段尿细菌计数确定泌尿系统感染有诊断意义的是 　　A.G－杆菌cfu/ml、G＋球菌cfu/ml 　　B.G－杆菌cfu/ml、G＋球菌cfu/ml 　　C.G－杆菌cfu/ml、G＋球菌cfu/ml 　　D.G－杆菌cfu/ml、G＋球菌cfu/ml 　　E.G－杆菌cfu/ml、G＋球菌cfu/ml

『正确答案』D『答案解析』中段尿细菌计数G－杆菌cfu/ml、G＋球菌cfu/ml对确定泌尿系统感染有诊断意义。

　　尿细菌培养结果诊断错误的是 　　A.阴性：一般细菌-/48h无细菌生长 　　B.G－杆菌cfu/ml有诊断意义 　　C.G＋球菌cfu/ml有诊断意义 　　D.G＋球菌cfu/ml有诊断意义 　　E.G＋球菌～cfu/ml可疑阳性

『正确答案』D『答案解析』G＋球菌cfu/ml有诊断意义。

　　常用下列哪种方法采集尿标本做细菌培养 　　A.清洁头段尿 　　B.清洁中段尿 　　C.留24小时尿 　　D.导尿 　　E.膀胱穿刺

『正确答案』B『答案解析』清洁中段尿常做细菌培养。

　　下列试验中，哪项试验可区别沙门菌与志贺菌 　　A.动力试验 　　B.尿素分解试验 　　C.甘露醇发酵试验 　　D.甲基红试验 　　E.枸橼酸盐利用试验

『正确答案』A『答案解析』沙门菌有动力，志贺菌无动力。

　　目前筛查伤寒带菌者的方法是检测血清的 　　A.O抗体 　　B.H抗体 　　C.K抗体 　　D.Vi抗体 　　E.O抗体加Vi抗体

『正确答案』D『答案解析』目前筛查伤寒带菌者的方法是检测血清的Vi抗体。

　　宋内志贺菌 　　A.为A群志贺菌 　　B.为B群志贺菌 　　C.包括10个血清型 　　D.培养中常有扁平的粗糙型菌落 　　E.快速发酵乳糖

『正确答案』D『答案解析』宋内志贺菌培养中常有扁平的粗糙型菌落。

五、变形杆菌属 　　变形杆菌属包括四个种，即普通变形杆菌、奇异变形杆菌、产黏变形杆菌、潘氏变形杆菌。 　　（一）生物学特性1.形态与染色为革兰阴性杆菌。两端钝圆，有明显的多形性，呈球状或丝状，有周身鞭毛，运动活泼。

2.培养普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株呈迁徙生长现象。产黏变形杆菌具有产生黏液状薄膜层的能力及溶血性质。 　　变形杆菌属的种鉴别：普通变形杆菌靛基质和麦芽糖均阳性，鸟氨酸脱羧酶阴性；奇异变形杆菌靛基质和麦芽糖均阴性，鸟氨酸脱羧酶阳性；产黏变形杆菌靛基质和鸟氨酸脱羧酶均阴性，麦芽糖阳性。

　　（二）致病性变形杆菌属普通变形杆菌OX19、OX2、0Xk的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，这就是外-斐（Weil-Felix）反应，是用以诊断某些立克次体病的依据。

　　（三）微生物检验1.标本采集2.检验方法及鉴定 　　（1）直接涂片。 　　（2）分离培养：将各类标本分别接种于血琼脂平板、麦康凯、EMB琼脂平板或SS琼脂平板上，35～37℃孵育18～24h后挑选可疑菌落。为了抑制变形杆菌属菌的迁徙生长，可于血琼脂中加入苯酚或苯乙醇。形成不发酵乳糖菌落，在SS琼脂上常为有黑色中心的菌落。 　　（3）鉴定：接种前述选择培养基，并作氧化酶试验，进行属和种鉴定。

六、耶尔森菌属 　　耶尔森菌属包括11个种，其中鼠疫耶尔森菌、假结核耶尔森菌和小肠结肠炎耶尔森菌与人类致病有关。 　　（一）鼠疫耶尔森菌 　　俗称鼠疫杆菌，是烈性传染病鼠疫的病原菌。鼠疫是自然疫源性传染病，通过直接接触染疫动物或节肢动物叮咬而感染。临床常见腺鼠疫、败血型鼠疫和肺鼠疫。

1.生物学特性 　　（1）形态与染色：鼠疫耶尔森菌为革兰阴性杆菌，形态短而粗，两端钝圆，两极浓染。有荚膜，无鞭毛，无芽胞。陈旧培养物或3%氯化钠琼脂培养基上呈明显多形性。 　　（2）培养：最适生长温度是28～30℃，最适pH为6.9～7.1。培养16～18h，用显微镜观察可见一层形状不一，浅灰色小菌落，对本菌的鉴定有一定意义。在液体培养基中生长良好，可形成絮状沉淀和菌膜。底部絮状沉淀堆积呈“钟乳石”状。 　　（3）生化反应：在双糖铁培养基上可分解葡萄糖，少数菌株可分解乳糖，不产生硫化氢，MIU培养基无动力，不产生靛基质，尿素酶试验阴性。

2.微生物检验 　　（1）标本采集：主要采集血液、痰和淋巴结穿刺液。 　　（2）检验方法及鉴定：鼠疫耶尔森菌为甲类病原菌，传染性极强，故应严格遵守检验操作规程，要求实验室有隔离设施，防鼠、防蚤和严密的个人防护措施。1）直接涂片检查：①制片：淋巴结、渗出液、骨髓和痰等可直接涂片，血液作成厚滴片，干燥后用蒸馏水裂解红细胞，脏器组织可行切面印片；②固定及染色：待标本干燥后，用甲醇与95%酒精或95%酒精与乙醚各半之混合固定液固定10min，待干后染色。一般制片两张，分别用于革兰染色和亚甲蓝染色。2）分离培养：经28～30℃培养24～48h后，挑选菌落作鉴定。3）鉴定：根据菌落特征，尤其是3%氯化钠琼脂上生长呈多形性形态和肉汤中呈“钟乳石”状，KIA结果利用葡萄糖，不利用乳糖，不产H2S，MIU均为阴性反应，即可初步鉴定。 　　为作最后鉴定应补充以下实验方法：①噬菌体裂解试验；②动物试验；③免疫学方法。

七、肠杆菌科的其他菌属 　　除上述主要对人致病的菌属外，肠杆菌科还包括枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属和欧文菌属。前四属在临床感染标本中具有较高的分离率。大多属于条件致病菌。 　　（一）枸橼酸杆菌属 　　枸橼酸杆菌属包括弗劳地枸橼酸杆菌、异型枸橼酸杆菌和无丙二酸盐枸橼酸杆菌三个种，这些细菌广泛分布于自然界，属正常菌群成员，凡粪便污染的物品，均可检出枸橼酸杆菌。

1.生物学特性 　　（1）形态与染色：革兰阴性杆状，单个或成对排列，通常无荚膜，无芽胞，具有周鞭毛，有动力。 　　（2）培养与生化反应：需氧或兼性厌氧，营养要求不高。在血液琼脂上的菌落呈灰色或白色，隆起，边缘整齐，直径2～4mm，不溶血，在肠道选择培养基上大多数菌株发酵乳糖。 　　枸橼酸杆菌IMViC（+-++） 　　生化反应是属内种的分类依据。三种枸橼酸杆菌，只有弗劳地枸橼酸杆菌靛基质阴性，硫化氢阳性，仅异型枸橼酸杆菌的丙二酸盐呈阳性反应。

2.致病性本菌为条件致病菌，常在一些慢性疾病如白血病、自身免疫性疾病或医疗插管术后的泌尿道、呼吸道中检出，可引起败血症、脑膜炎、骨髓炎、中耳炎和心内膜炎等。3.微生物检验 　　（1）标本采集：根据病情可取尿液、痰、血液或脓汁等。 　　（2）检验方法及鉴定：各类标本在血平板分离培养后根据菌落特征，结合涂片染色结果及氧化酶、发酵型证实为肠杆菌科的细菌，再相继作属、种鉴定。1）属的鉴定：β-半乳糖苷酶、赖氨酸脱羧酶和枸橼酸盐利用三个试验枸橼酸杆菌属为+-+，沙门菌属为-/+++，爱德华菌属为-+-。2）种的鉴别：根据产生靛基质、硫化氢、丙二酸盐与否鉴别。

　　（二）克雷伯菌属 　　属细菌共有7个种，医院感染日见增多，其中以肺炎克雷伯菌最为多见。产酸（催娩）克雷伯菌次之。1.生物学特性 　　（1）形态与染色：革兰阴性，菌体呈卵圆形或球杆状，成双排列，有明显荚膜，无鞭毛，无芽胞。培养物菌体较长，可呈多形性或丝状。 　　（2）培养：需氧或兼性厌氧，营养要求不高，在普通营养培养基上即可生长。在血琼脂上，35℃培养24h，形成3～4mm圆形，凸起，灰白色，不溶血的菌落。有时菌落呈现黏液型，用接种环挑取时呈长丝状。在肠道菌选择培养基中为分解乳糖菌落，色泽与大肠埃希菌相似。在液体培养基中呈混浊生长，可形成菌膜与黏性沉淀物。 　　肺炎克雷伯菌粘丝试验 　　（3）生化反应：本属的生化反应特征是触酶阳性、脲酶阳性、氧化酶阴性、鸟氨酸脱羧酶阴性。大多数菌株发酵乳糖。其中动力和鸟氨酸脱羧酶阴性是本菌的最大特点。

2.致病性　肺炎克雷伯菌肺炎亚种引起婴儿肺炎、脑膜炎、肠炎、腹膜炎、外伤感染、败血症和成人医源性尿道感染。 　　催娩克雷伯菌可引起呼吸道和泌尿道感染、创伤感染与败血症等。3.微生物检验 　　（1）标本的采集：肠炎患者采集粪便，败血症者采集血液，其他根据病症分别采集尿液、脓汁、痰、脑脊液、胸腔积液及腹水等。

　　（2）检验方法及鉴定1）涂片染色：有些标本可直接涂片染色镜检，镜下出现带有荚膜的革兰阴性杆菌。无芽胞，无鞭毛。2）分离培养：需氧或兼性厌氧，营养要求不高。将粪便标本接种于肠道选择鉴别培养基，血液标本先经增菌后接种血平板，经35℃～37℃培养16～24h，取肠道选择鉴别培养基上乳糖发酵的黏性菌落或血琼脂上灰白色大而黏的菌落进行涂片，染色镜检。3）鉴定： 　　根据KIA、MIU，结合甲基红试验、V-P试验、枸橼酸盐利用及氧化酶结果进行初步鉴定。 　　属的鉴定：动力和鸟氨酸脱羧酶均为阴性反应。 　　种的鉴定：肺炎克雷伯菌吲哚阴性和不能在10℃生长，而催娩克雷伯菌吲哚阳性，能在10℃生长，不能在25℃生长。

　　（三）肠杆菌属 　　肠杆菌属包括阴沟肠杆菌、产气肠杆菌、聚团肠杆菌、日勾维肠杆菌、坂崎肠杆菌、中间型肠杆菌及河生肠杆菌等11个种。1.生物学特性 　　（1）形态与染色：革兰阴性短而粗的杆菌，有周鞭毛，能运动，部分菌株有荚膜，无芽胞。 　　（2）培养：需氧或兼性厌氧，最适温度为30℃，营养要求不高，在普通培养基上即可生长。在普通琼脂上形成大而湿润的黏液状菌落；在血琼脂板上不溶血；肠道菌选择培养基上多数形成乳糖发酵菌落，但聚团肠杆菌例外；在液体培养基中呈均匀混浊，表面有薄膜，管底有黏稠性沉淀物。 　　（3）生化反应：氧化酶阴性，大多数菌株发酵乳糖，鸟氨酸脱羧酶（聚团肠杆菌除外）和枸橼酸盐利用均阳性，DNA酶阴性，河生肠杆菌和中间型肠杆菌的区别是前者精氨酸双水解酶阳性，后者阴性；其余5种肠杆菌可用脲酶、鸟氨酸和赖氨酸脱羧酶及山梨醇发酵进行区别，即阴沟肠杆菌为-+-+，坂崎肠杆菌为-+--，聚团肠杆菌为---+/-，产气肠杆菌为-+++，日勾维肠杆菌为+++-。

2.致病性本菌属广泛分布于自然界，在土壤、水和日常食品中常见。阴沟、产气、聚团、日勾维等肠杆菌常导致条件致病，引起呼吸道、泌尿生殖道感染，亦可引起菌血症，引起新生儿脑膜炎。3.微生物检验 　　（1）标本采集：根据临床病症可采集血液、尿液、脓汁、脑脊液及其他材料。 　　（2）检验方法及鉴别：1）与大肠埃希菌的鉴别：主要根据IMViC反应结果，肠杆菌属多为--++；而大肠埃希菌是++--。2）与肺炎克雷伯菌的鉴别：产气肠杆菌、阴沟肠杆菌和肺炎克雷伯菌的IMViC结果均为--++，区别是前两者动力阳性，后者动力阴性。 　　产气肠杆菌、阴沟肠杆菌和肺炎克雷伯菌IMViC试验（--++） 　　区别是前两者动力阳性，后者动力阴性。

　　（四）沙雷菌属 　　沙雷菌属包括黏质沙雷菌、液化沙雷菌、深红沙雷菌、普城沙雷菌、气味沙雷菌、虫媒沙雷菌、居泉沙雷菌及无花果沙雷菌。本属菌广泛分布于自然界，是水和土壤中常居菌群，也是重要的条件致病菌。1.生物学特性 　　（1）形态与染色：为革兰阴性细小杆菌，有周鞭毛，能运动，有些菌种有微荚膜，无芽胞。 　　（2）培养：兼性厌氧，适合生长温度为35℃，在4%氯化钠条件下可生长。营养要求不高，在普通营养琼脂呈白色或粉红色菌落。各种沙雷菌株可以产生两种色素：灵菌红素（非水溶性）和吡羧酸（水溶性）。 　　（3）生化反应：能发酵多种糖，能利用枸橼酸盐等作为唯-碳源，胞外酶可水解DNA、脂酸、明胶和邻位硝基苯-β-半乳糖苷。本属的关键生化反应是DNA酶阳性、葡萄糖酸盐阳性。2.致病性黏质沙雷菌可导致呼吸道与泌尿道感染。液化沙雷菌存在于植物和啮齿类动物的消化道中，是人的条件致病菌，主要引起呼吸道感染。3.微生物检验血液、尿液、痰、脓液等标本的检验程序和方法可参照克雷伯菌。 　　沙雷菌与其他菌属细菌的根本区别是沙雷菌具DNA酶和葡萄糖酸盐阳性。

　　习题 　　鼠疫属于哪类传染病 　　A.甲类 　　B.乙类 　　C.丙类 　　D.丁类 　　E.未定类

『正确答案』A『答案解析』鼠疫属于甲类传染病。

　　“黑死病”的病原体为 　　A.产气荚膜梭菌 　　B.鼠疫耶尔森菌 　　C.沙门菌 　　D.军团菌 　　E.布鲁菌

『正确答案』B『答案解析』“黑死病”的病原体为鼠疫耶尔森菌。

　　沙雷菌与其他菌属细菌的根本区别是 　　A.靛基质试验阳性 　　B.DNA酶和葡萄糖酸盐阳性 　　C.H2S试验阳性 　　D.触酶试验阳性 　　E.氧化酶试验阳性

『正确答案』B『答案解析』沙雷菌DNA酶和葡萄糖酸盐阳性。

　　克雷伯菌属最大特点是 　　A.靛基质试验阴性 　　B.DNA酶和葡萄糖酸盐阴性 　　C.动力和鸟氨酸脱羧酶阴性 　　D.触酶试验阴性 　　E.氧化酶试验阴性

『正确答案』C『答案解析』克雷伯菌属最大特点是动力和鸟氨酸脱羧酶阴性。

　　鼠疫杆菌的抗原不包括 　　A.荚膜 　　B.V抗原 　　C.W抗原 　　D.菌毛 　　E.鼠毒素

『正确答案』D『答案解析』鼠疫杆菌没有菌毛。

　　鼠疫杆菌的传播媒介是 　　A.鼠蚤 　　B.鼠虱 　　C.恙螨 　　D.蚊 　　E.蜱

『正确答案』A『答案解析』鼠疫杆菌的传播媒介是鼠蚤。

　　鼠疫的微生物检查，下列哪种标本不能检出病原菌 　　A.淋巴结穿刺液 　　B.病人粪便 　　C.血液 　　D.病人痰液 　　E.尸体肝、脾、肺等组织

『正确答案』B『答案解析』鼠疫不能再病人粪便中检查出病原体。

　　与立克次体有交叉抗原的肠道杆菌是 　　A.沙门菌的某些菌株 　　B.志贺菌的某些菌株 　　C.埃希菌的某些菌株 　　D.变形杆菌的某些菌株 　　E.克雷伯菌的某些菌株

『正确答案』D『答案解析』变形杆菌属普通变形杆菌OX19、OX2、0Xk的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，这就是外-斐（Weil-Felix）反应，是用以诊断某些立克次体病的依据。

　　在液体培养基中生长能形成菌膜、振动后菌膜呈“钟乳石”状下沉的细菌是 　　A.沙门菌 　　B.志贺菌 　　C.大肠埃希菌 　　D.变形杆菌 　　E.鼠疫耶尔森菌

『正确答案』E『答案解析』鼠疫耶尔森菌在液体培养基中生长能形成菌膜、振动后菌膜呈“钟乳石”状下沉。

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